Enzim ölçümü: Revizyonlar arasındaki fark

'''Enzim ölçümleri''' [[enzim]] aktivitesini ölçmek için laboratuvar yöntemleridir. [[Enzim kinetiği]]ni ve [[enzim inhibitörü|enzim inhibisyonunun]] araştırılması için önemlidirler.

Bir enzimin spesifik aktivitesi yaygın kullanılan bir diğer birimdir. Bu, bir enzimin, 1 miligram toplam proteindeki aktivitesidir ve μmol dk^-1mg^-1 (mikromol bölü dakika bölü miligram) olarak ifade edilir. Spesifik aktivite enzim aktivitesinin bir ölçüsüdür. Toplam proteinin miligramı başına, belli bir süre zarfında ve belli şartlarda bir enzim tarafından meydana getirilen ürün miktarıdır. Spesifik aktivite reaksiyon hızı çarpı reaksiyon hacmi bölü toplam protein kütlesine eşittir. SI birimi katal kg^-1'dir amadahaama daha pratik bir birim μmol mg^-1 dk^-1'dir. Spesifik aktivite enzim [[ilerleyicilik|ilerleyiciliğinin (İng. ''prosesivity'')]] bir ölçüsüdür, belli bir substrat konsantrasyonunda (genelde enzimi doyurucu bir konsantrasyon kullanılır) ve saf enzim için genelde sabit bir değerdir. Enzimin saflaştırmasındaki veya diğer faktörlerdeki toplu iş (İng. ''batch'') farklılıklarından kaynaklanan hataları bertaraf etmek için bir aktif bölge titrasyonu yapılması gerekir. Aktif bölge miktarını titre etmek için tersinmez bir enzim inhibitörü kullanılır, böylece aktif enzim miktarı ölçülür. Bu durumda, spesifik aktivite μmol min^-1 mg^-1 aktif enzim olarak ifade edilmelidir.

[[Kalorimetri]] kimyasal reaksiyonlarda yayılan veya emilen ısının ölçümüdür. Çoğu reaksiyon bir ısı değişimine yol açtığı için bu yöntem çok genel amaçlıdır. Bir mikrokalorimetre kullanılırsa ölçüm için az miktarda enzim veya substrat yeterlidir. Başka yolla ölçülemeyen reaksiyonlar bu ölçüm yöntemi ile takip edilebilir.<ref>{{cite journal |author=Todd MJ, Gomez J |title=Enzyme kinetics determined using calorimetry: a general assay for enzyme activity? |journal=Anal. Biochem. |volume=296 |issue=2 |pages=179–87 |year=2001 |month=September |pmid=11554713 |doi=10.1006/abio.2001.5218 |url=http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0003-2697(01)95218-2}}</ref>

*'''Kalabalıklık derecesi''': Çözeltideki yüksek miktarda [[makromolekül]] olması, [[makromoleküler kalabalıklaşma]] adı verilen bir etki ile, enzim reaksiyonlarının [[reaksiyon hızı]]nı ve [[denge sabiti|denge sabitlerini]] etkiler.<ref name=Minton>{{cite journal |author=Minton AP |title=The influence of macromolecular crowding and macromolecular confinement on biochemical reactions in physiological media |journal=J. Biol. Chem. |volume=276 |issue=14 |pages=10577–80 |year=2001 |pmid=11279227 |doi=10.1074/jbc.R100005200 |url=http://www.jbc.org/cgi/content/full/276/14/10577}}</ref>